吴定妃（16世纪？—1555年），名失考。中国古代明朝皇族女性，明世宗朱厚熜之妃。
吴氏入宫时间、年龄均无考。吴氏生前未封妃，嘉靖三十四年（1555年）闰十一月二十九日，未封妃吴氏薨，赐号为定，丧仪如平妃耿氏[1]。嘉靖三十五年（1556年）二月二十五日，授定妃吴氏父吴登为锦衣卫副千户[2]。
