高通量基因克隆技術

高通量基因克隆技術(Gateway Cloning Technology),是由Invitrogen公司在二十世紀九十年代末發明並應用於分子生物學基因克隆的一項專利技術。該技術利用專有的重組序列使得DNA片段能夠更有效地被轉入質體當中,可應用於大片段的基因克隆,並且在保持正確閱讀框的前提下讓不同表達載體間的DNA轉移成為可能。

這一技術在插入的目的DNA片段兩端整合att L1和att L2兩個側端重組序列(Flanking Recombination Sequence),來構建一個類似通道的結構並稱之為「入門克隆」(Gateway Entry Clone)。據Invitrogen宣稱Gateway技術使用99%有效且可逆的一小組重組反應[1] ,如此使得基因克隆不同於傳統的限制性內切酶方法,避免了目的片段內存在切點的問題而使得大片段DNA保持其完整性,大大提高了克隆效率,常應用於大規模的DNA片段整合進同一種表達載體,因此稱之為高通量基因克隆技術。

參考資料

  1. ^ Gateway® 重组克隆技术. [2012-03-23]. [永久失效連結]