阿爾瑪藍
阿爾瑪藍（7-羥基-3H-3-酚惡嗪-10-氧化物）是一種酚嗪類染料，具有弱熒光性、細胞滲透性，無毒，對氧化還原敏感[2][3]。阿爾瑪藍有藍色至紫色（在pH>6.5），用於微生物學、細胞生物學和酶學檢測，因為它可以不可逆地還原成粉紅色和高熒光的試鹵靈（9-羥基3H-3-異吩惡嗪酮）。在接近中性的pH值下，可以通過肉眼觀察其粉紅色或通過熒光測定法來檢測試鹵靈，其激發光波長最大值在530-570 nm，熒光波長最大值在580-590 nm[4]。
| 阿爾瑪藍 | |
|---|---|
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| IUPAC名 7-hydroxy-10-oxidophenoxazin-10-ium-3-one | |
| 識別 | |
| CAS編號 | 72-51-7 
|
| PubChem | 11077 |
| ChemSpider | 10616 |
| SMILES |
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| InChI |
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| InChIKey | PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYAB |
| 性質 | |
| 化學式 | C12H7NO4 |
| 摩爾質量 | 229.19 g·mol−1 |
| 溶解性（水） | 可溶於水 |
| 危險性 | |
| H-術語 | H315, H319, H335 |
| P-術語 | P261, P305+P351+P338 |
| NFPA 704 |
 1
2
0
|
| 若非註明，所有數據均出自標準狀態（25 ℃，100 kPa）下。 | |
當含有阿爾瑪藍的溶液被處於還原條件下（Eh<-110 mV）時，幾乎所有的阿爾瑪藍都被可逆地還原成半透明的無熒光的二氫試鹵靈，溶液變得半透明（阿爾瑪藍/二氫試鹵靈對的氧化還原電位在pH=7.0時為-51 mV，標準氫電極）。當溶液的Eh增加時，二氫試鹵靈被氧化成試鹵靈，這種可逆反應可用於監測培養基的氧化還原電位是否保持在足夠低的水平，以利於厭氧生物的生長繁殖。
| 阿爾瑪藍（酸鹼指示劑） | ||
| 低於pH 6.5 時 | 高於pH 6.5 時 | |
| 6.5 | ⇌ | 6.5 |
阿爾瑪藍溶液的DI值的是已知最高值之一[5]。當觀察到的樣品的厚度或濃度發生變化時，溶液的感知色相會有很大的變化。
通常情況下，阿爾瑪藍以鈉鹽的形式存在。
測定細胞活力的應用
阿爾瑪藍在代謝活躍的細胞中可以通過有氧呼吸被還原成試鹵靈，因此可以被用作細胞活力的指標。在1929年，阿爾瑪藍被Pesch和Simmert首次用於量化牛奶中的細菌含量[6]。阿爾瑪藍可用於檢測哺乳動物細胞培養物中是否存在有活力的細胞[7]。它最初以Alamar BlueTM（Trek Diagnostic Systems, Inc）進行商業推廣，現在也有其他名稱如AB assay、Vybrant（Molecular Probes）和UptiBlue（Interchim）。
因為阿爾瑪藍的檢測在實驗中顯示出與存活率的高相關性，如基於formazan的檢測（MTT/XTT）和胸腺嘧啶核苷雙阻斷法[8]，又因為其低毒性使其適用於較長時間的研究，所以它已被廣泛應用於動物細胞、細菌和真菌[8]的細胞培養檢測，如細胞計數、細胞生存和細胞增殖[9]。
阿爾瑪藍還可以與化學熒光法同時使用，可以測量細胞因子、細胞凋亡的caspase，或基因或蛋白質表達。阿爾瑪藍到試鹵靈的不可逆反應強度正比於細胞進行有氧呼吸的強度[10]。
參考文獻
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- ^ Kreft, Samo; Kreft, Marko. Quantification of dichromatism: a characteristic of color in transparent materials. Journal of the Optical Society of America. A, Optics, Image Science, and Vision. 2009-07, 26 (7): 1576–1581 [2022-04-20]. ISSN 1084-7529. PMID 19568292. doi:10.1364/josaa.26.001576. （原始內容存檔於2021-08-30）.
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- ^ 8.0 8.1 technical manual (PDF). [2022-04-20]. （原始內容存檔 (PDF)於2011-07-21）.
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- ^ González-Pinzón, Ricardo; Haggerty, Roy; Myrold, David D. Measuring aerobic respiration in stream ecosystems using the resazurin-resorufin system: MEASURING STREAM RESPIRATION WITH RAZ. Journal of Geophysical Research: Biogeosciences. 2012-09, 117 (G3): n/a–n/a. doi:10.1029/2012JG001965 （英語）.