磷酸盐缓冲生理盐水
磷酸盐缓冲生理盐水(英语:Phosphate buffered saline,简称为PBS)是生物学研究中常用的缓冲液。这是一种以水为溶剂的含磷酸钠的盐溶液,在某些配方中还加入了氯化钾及磷酸钾。该溶液的渗量与离子浓度与人体中的是相符的。
应用
因其等张且对细胞无毒性,PBS非常常用。用法包括:稀释物质及清洗细胞容器。含EDTA的PBS亦常用于解开贴壁及成团的细胞,而不能加入如锌等的二价金属,因为这样会导致沉淀。针对不同的应用,常使用古德氏缓冲液。
配制
配制PBS的方法有多种。一些配方不含钾离子,而另一些配方含钙或镁[1]。通常PBS含下列组分:
盐 | 浓度 | 浓度 |
---|---|---|
(mmol/L) | (g/L) | |
NaCl | 137 | 8.01 |
KCl | 2.7 | 0.20 |
Na2HPO4·2H2O | 10 | 1.78 |
KH2PO4 | 2.0 | 0.27 |
pH 7.4 |
配制PBS溶液的最简单方法是使用PBS片,后者是已制好的配方片剂,当需要使用PBS时只需将其溶解于一定量的蒸馏水里即可,标准容积有:100、200、500和1000 mL[2]。
配好的PBS溶液经分装并高压灭菌(20分钟,121℃)后即可用于细胞培养。PBS可储存于室温,但如果溶液未经灭菌而希望保存时间长些,则需要将其冷藏于冰箱中,这样会抑制细菌生长。然而浓缩储存液在冷藏时会产生沉淀,在使用之前需要置于室温使沉淀完全溶解。
另见
参考文献
- ^ Dulbecco, R. et al. (1954): Plaque formation and isolation of pure lines with poliomyelitis viruses. In: J. Exp. Med. vol. 99 (2), pp. 167-182. doi:10.1084/jem.99.2.167 PMID 13130792
- ^ Medicago AB, (2010) Phosphate buffered saline specification sheet (PDF). [2013-11-03]. (原始内容存档 (PDF)于2013-11-04).